miércoles, 10 de junio de 2009

3ra unidad investigacion tincion de Gram

TINCION DE GRAM
Una de las tecnicas mas utilizadas y mas importantes en microbiologia, llamada asi en honor de su inventor Crhistian gram, esta tecnica divide en dos grupos a las bacterias, Gram positivas y Gram negativas.
Esta tincion consiste en aplicar a la extension de celulas previamente fijadas las siguientes soluciones en el orden que se indica:

Violeta de cristal: Es el primer colorante de la serie Gram, el proposito de este primer paso es impartir color a todos los microorganismos en el frotis.

Yodo de Gram o yodo Lugol: Esta solucion actua como mordente, una sustancia que actua o refuerza la union entre un colorante y su sustrato.

Solucion decolorante: (Mezcla de alcohol-acetona o simplemente alcohol al 95%), se conoce como decolorante porque disuelve o arrastra fuera de las celulas el colorante primario (violeta de cristal), la decoloracion es el paso mas critico de esta tecnica pues el comportamiento de las celulas durante este proceso es responsable de la diferencia esencial entre organismos Gram positivos y Gram negativos.

Safranina de Gram: Es un colorante rojo que se aplica con el objeto de contrateñis aquellos organismos que se destiñeron con la solucion decolorante, debido a que estos se han tornado invisibles (incoloros).
De esta menra se designa: Gram negativos a cualquier organismo que tome la coloracion roja de la safranina y Gram positivos a los organismos que retienen el colorante primario (cristal violeta).







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